Döner Buharlaştırıcıda HPLC Analizinin Uygulanması

Yüksek performanslı sıvı kromatografisine (HPLC) aynı zamanda yüksek basınçlı sıvı kromatografisi, yüksek hızlı sıvı kromatografisi, yüksek çözünürlüklü sıvı kromatografisi ve modern kolon kromatografisi de denir. 1970'lerde hızla geliştirilen etkili ve hızlı bir analitik ayırma teknolojisidir ve modern ayırma testinin önemli bir aracıdır.

Yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC), mobil faz olarak sıvıyı kullanır ve farklı polaritelere sahip tek solvent veya farklı oranlarda karışık solvent ve tampon çözeltisi gibi mobil fazı, sabit fazlı kromatografik kolona pompalamak için yüksek basınçlı infüzyon sistemini kullanır. Kolondaki bileşenler ayrıldıktan sonra numunenin analizini gerçekleştirmek üzere tespit için dedektöre girerler.

Yüksek performanslı sıvı kromatografisinin ayırma mekanizması, geleneksel kolon kromatografisiyle aynıdır, ancak paketleme daha incedir ve yüksek kolon verimliliğine ve hızlı analiz hızına sahip olan yüksek basınçlı pompa tarafından itilmesi gerekir. Sıvı kromatografide mobil faz, gaz kromatografisinden farklı olarak bileşenlerin ayırma işlemine de katılır ve bileşimi, oranı ve pH değeri, çeşitli ayırma modlarıyla esnek bir şekilde ayarlanabilir. Uygulamada, kromatografik kolondaki örneklerin alıkonma değeri ve seçiciliği, mobil fazın bileşimi değiştirilerek ayarlanır, böylece farklı örnekler ayrılabilir.

 

HPLC analizinin bileşenleri

 

Kolon: Kolon, numunedeki bileşikleri ayırmak için kullanılan HPLC sisteminin temel bileşenidir. Yaygın ayırma sütunları arasında ters faz sütunu, iyon değiştirme sütunu, jel filtrasyon sütunu vb. yer alır ve bunların seçimi, ayrılacak bileşiğin özelliklerine ve analiz amacına bağlıdır.

Mobil aşama: Mobil faz, bir numuneyi bir ayırma kolonundan geçirmek için HPLC'de kullanılan solventlerin bir kombinasyonudur. Mobil faz genellikle tek bir solvent veya birden fazla solventin belirli bir oranda karışımı olabilen solventlerin bir karışımından oluşur. Uygun akışın seçilmesi ayırma etkisi açısından çok önemlidir.

Pompa: Pompa, hareketli fazı sağlamak ve belirli bir basınçta ayırma kolonundan itmek için kullanılır. Yaygın pompalar arasında sabit basınç pompası ve gradyan pompası bulunur. Gradyan pompa, daha iyi ayırma etkisi elde etmek için mobil faz bileşiminin doğrusal veya doğrusal olmayan değişimini gerçekleştirebilir.

Enjektör: Enjektör, analiz edilecek numunenin HPLC sistemine verilmesi için kullanılır. Örnekleyici, manuel olarak çalıştırılan bir şırınga veya otomatik bir örnekleyici olabilir. Doğru numune enjeksiyonunu sağlamak için genellikle doğru hacim ve iyi tekrarlanabilirlik özelliklerine sahiptirler.

Sütunlu Fırın: Kolon fırını, ayırma kolonunun sıcaklığını kontrol etmek için kullanılır. Sıcaklığın kontrol edilmesiyle numunenin kolondaki dağılım katsayısı ve ayrılma hızı değiştirilebilir, böylece ayırma etkisi optimize edilebilir.

Dedektör: Dedektör, ayrılan bileşiği tespit etmek ve konsantrasyonuyla ilgili bir elektrik sinyali oluşturmak için kullanılır. Yaygın dedektörler arasında ultraviyole görünür absorpsiyon dedektörü, floresans dedektörü ve elektrokimyasal dedektör bulunur. Dedektör seçimi, analiz edilecek bileşiğin özelliklerine ve tespit hassasiyeti gerekliliklerine bağlıdır.

Veri Toplama Sistemi: Veri toplama sistemi, dedektörden çıkan sinyallerin alınması, kaydedilmesi ve analiz edilmesi için kullanılır. Tespit edilen sinyali tepe alanı, alıkonma süresi gibi parametrelere dönüştürerek sonuçların analiz edilmesini ve yorumlanmasını sağlayabilir.

 

Çözücü uzaklaştırıldıktan sonradöner buharlaştırıcıelde edilen numune genellikle konsantre veya katıdır. Numunedeki bileşikleri daha fazla analiz etmek veya tespit etmek istiyorsanız bunları yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) ile analiz edebilirsiniz.

HPLC ile döner buharlaştırma sonrasında numunelerin analiz edilmesine yönelik genel adımlar

 

1. Numunenin çözünmesi: numuneyi döner buharlaştırmadan sonra uygun bir solvent içerisinde çözün. Çözücüler seçilirken analiz edilecek maddenin çözünürlüğü ve HPLC analiz koşullarının gereklilikleri dikkate alınmalıdır.

2. Standart çözeltinin hazırlanması: Kantitatif analize ihtiyaç duyulursa, test edilecek bileşiğin standart çözeltisi, analiz sonuçlarının daha sonra düzeltilmesi ve hesaplanması için hazırlanabilir.

3. HPLC analizini gerçekleştirin: numuneyi HPLC sistemine enjekte edin ve uygun ayırma kolonunu, mobil fazı ve dedektörü ayarlayın. Analizin amacına göre akış hızı, sıcaklık ve gradyan programı gibi uygun yöntem ve parametreleri seçin.

4. Veri toplama ve analiz: Numunenin kromatogramı HPLC sistemi tarafından toplanır ve hedef bileşik, pik alanına, alıkonma süresine veya diğer ilgili parametrelere göre ölçülür veya tanımlanır. Kantitatif analiz için standart eğri yöntemi ve dahili standart yöntemi kullanılabilir.

5. Sonuçların Yorumlanması: Analiz sonuçlarına göre numunedeki bileşikler niteliksel ve niceliksel olarak değerlendirilmiştir. İhtiyaçlara göre rapor oluşturabilir veya analiz sonuçlarını kaydedebilirsiniz.

 

HPLC analizinde rotovap uygulamasının iki pratik anlamı vardır

 

• Numune konsantrasyonu: Bazı durumlarda, analiz edilecek numunenin konsantrasyonu çok düşük olabilir, dolayısıyla HPLC'de analitin tespit hassasiyetini artırmak için numuneyi konsantre etmek için kimyasal döner buharlaştırıcı kullanılabilir.
• Çözücünün çıkarılması: Bazı örneklerde çözücüler HPLC analizine müdahale edebilir, bu nedenle numunelerdeki çözücülerin HPLC'ye uygun çözücülerle çıkarılması veya değiştirilmesi gerekir. Laboratuvar döner buharlaştırıcı, solventin uzaklaştırılmasına ve numunenin HPLC analizi için uygun bir forma dönüştürülmesine yardımcı olabilir.

 

HPLC analizi vedöner buharlaştırıcıKimyasal analizde yaygın olarak kullanılan iki teknik olup, prensip ve uygulama açısından bazı farklılıkları ve bağlantıları vardır.

 

Fark

 

Prensip: HPLC, sıvı kromatografi prensibine dayanır ve ayırma ve kantitatif analiz, sabit faz (kolon) ile hareketli faz (çözücü) arasındaki etkileşimle gerçekleştirilir. Evaporatör, numuneyi konsantre etmek veya numunenin solvent ortamını değiştirmek amacıyla sıvı numuneyi hızlı bir şekilde buharlaştırmak ve solventi uzaklaştırmak için ısıtma ve döndürme prensibini kullanır.

Uygulama alanı: HPLC kimya, eczacılık, çevre ve diğer alanlarda yaygın olarak kullanılmaktadır ve karmaşık karışımlardaki bileşiklerin ayrılması, tanımlanması ve kantitatif analizi için kullanılabilir; Döner buharlaştırma esas olarak numune konsantrasyonu, solvent giderme ve numune hazırlama işlemlerinde kullanılır ve genellikle organik sentez, doğal ürün ekstraksiyonu, numune hazırlama ve diğer alanlarda kullanılır.

Analiz hızı: HPLC analizinin numuneleri ayırması ve tespit etmesi genellikle uzun zaman alır; bu süre birkaç dakikadan birkaç saate kadar sürebilir; Vakumlu döner buharlaştırıcı ünitesi, sıvı numuneleri kısa sürede, genellikle yalnızca birkaç dakika içinde hızlı bir şekilde buharlaştırabilir.

 

Bağlamak

 

Örnek tedavi: Döner buharlaştırıcı ekipmanı, numuneleri HPLC gibi ileri analiz yöntemlerine uygun hale getirmek amacıyla numune hazırlama sırasında numuneleri konsantre etmek veya solventleri çıkarmak için sıklıkla kullanılır. HPLC analizinin etkisi ve doğruluğu, numunenin konsantre edilmesi ve çözücünün döner buharlaştırıcıyla uzaklaştırılmasıyla geliştirilebilir.

Çözücü seçimi: HPLC analizinde solvent seçimi ayırma etkisi açısından çok önemlidir;döner buharlaştırıcısolventin numuneden uzaklaştırılmasına ve numunenin HPLC analizi için uygun bir forma dönüştürülmesine yardımcı olabilir. Bu nedenle döner buharlaştırıcı, HPLC analizi için tatmin edici solvent koşulları sağlayabilir.

 

Manuel kaldırma rotovap ve elektrikli kaldırma rotovap sağlıyoruz, lütfen bizimle iletişime geçinsales@achievechem.comkendi döner buharlaştırıcı makinenizi özelleştirmek için.